全自動血細胞分析儀
Celltac
數據說明
Celltac臨床數據手冊
監修
東京大學醫學部附屬醫院
檢查部 血液形態檢查室
常名 政弘
前 言
近年來,醫療技術進步明顯,自動化和系統化在臨床診斷領域也在不斷發展,并且通過自動檢測設備可以在短時間內獲得大量檢查結果。但是,在血液學檢查中存在難以自動化的形態學檢查。負責臨床檢查的技術人員的知識和經驗會對檢查結果的質量產生很大影響,在此我們希望擔當檢查的負責人能夠不斷努力,提高形態學方面的技能。
基于這一背景情況,自動血細胞分析儀通過數值結果以及從直方圖和散點圖中獲得的信息,可以用于形態學檢查中的篩選。
在本手冊中,為了說明Celltac的測量數據,我們通過直方圖和散點圖對其檢測原理和標志信息進行了說明。此外,每個病例都配有細胞照片和形態學觀察,這不僅可以用于識別檢查結果中的異常情況,還可以用作教育材料。我們希望本手冊能夠為臨床實驗室的日常工作提供一定幫助,并有助于提高工作效率。
1. Celltac的白細胞5分類分析?
1.1 Celltac的流式細胞術原理?
1.2 通過散點圖進行的白細胞5分類?
1.3 標志與符號標記?
2. 散點圖和血細胞形態?
2.1 正常樣本的測量示例與布局范例
2.2 造血干細胞的分化和成熟
3. 白細胞增多
3.1 中性粒細胞增多
3.2 淋巴細胞增多?
3.3 單核細胞增多
3.4 嗜堿性粒細胞增多
3.5 出現異型淋巴細胞?
4. 髓系異常
4.1 關于急性白血病的分類?
4.2 急性髓系白血病 AML-M0
4.3 急性髓系白血病 AML-M1
4.4 急性髓系白血病 AML-M2
4.5 急性髓系白血病 AML-M3(APL)
4.6 急性髓系白血病 AML-M4
4.7 急性髓系白血病 AML-M5b
4.8 急性髓系白血病 AML-M6
4.9 急性髓系白血病 AML-M7
4.10 慢性髓系白血病?
4.11 慢性粒單核細胞白血病
4.12 原發性骨髓纖維化?
目? 錄
4.13 骨髓增生異常綜合征 MDS RCMD
(有環形鐵粒幼細胞)
4.14 骨髓增生異常綜合征 MDS RAEB-1
4.15 骨髓增生異常綜合征 MDS RAEB-2
4.16 骨髓增生異常綜合征 MDS RAEB-2
(有環形鐵粒幼細胞)
5. 淋巴細胞系異常
5.1 B細胞急性淋巴細胞白血病
5.2 T細胞急性淋巴細胞白血病
5.3 慢性淋巴細胞白血病
5.4 塞扎里綜合征
5.5 濾泡性淋巴瘤
5.6 伯基特淋巴瘤
5.7 大顆粒淋巴細胞增多的病例
(在慢性髓系白血病治療期間)
6. 其他異常(紅細胞系)
6.1 紅細胞緡錢狀形成
6.2 出現破碎紅細胞
6.3 缺鐵性貧血
6.4 巨幼紅細胞性貧血
6.5 地中海貧血
7. 其他異常(血小板系)
7.1 原發性血小板增多癥
7.2 出現血小板聚集
目? 錄
Celltac的白細胞5分類分析
1.
1.1 Celltac的流式細胞術原理
日本光電的Celltac系列血細胞分析儀用紅色半導體激光照射白細胞,通過激光散射光檢測方法(流式細胞術)分析檢測到的散射光,并將白細胞分為中性粒細胞、嗜酸性粒細胞、嗜堿性粒細胞、單核細胞、淋巴細胞五種類型。
散射光的模式可以捕捉到以下3種細胞信息。
● 細胞大小(Size)
● 細胞內部信息(Complexity)
● 顆粒信息(Granularity)
通過流動池周圍安裝的兩個透鏡(菲涅耳透鏡),可以分為前小角度(FSS),前大角度(FLS)和側角(SDS)三個方向聚光,并檢測出它們各自的散射強度。FSS反映細胞大小(Size),FLS反映細胞內部信息(Complexity),SDS反映顆粒信息(Granularity)(圖1)。通過對三束散射光信息進行三維分析,可以明確地將細胞分成五組。
通過無染色方法進行高精度和低成本的白細胞鑒別
Celltac的白細胞5分類能夠在盡可能地保持每個細胞在外周血中看到的狀態下識別形態特征。由此,它可以獲得與生物體內相近的信息。另外,采用流式細胞術同時分析單通道白細胞,實現了在共同環境下進行相對細胞的定量分析。由此,它可以實現以更少的試劑進行高精度的白細胞5分類,并且有助于減輕管理所耗費的精力和降低管理成本。
圖1 流動池單元的內部圖像
1.2 通過散點圖進行的白細胞5分類
散點圖是根據從散射光強度中獲得的三種細胞形態信息(Size、Complexity、Granularity)而繪制的圖,它在如圖2所示的三維坐標上標繪出了每個細胞的數據。與二維分析相比,通過使用三維坐標,可以清楚地對各細胞群進行分類,從而能夠高精度地進行檢測。每個細胞的分布圖顯示在圖3中的三種類型的散點圖上。
與目視計算時的參照信息相關的散點圖
????
由于通過Celltac的流式細胞術檢測出的三種細胞形態信息(Size、Complexity、Granularity)與目視計數的判斷標準相同,因此可以容易地解讀散點圖數據。通過參考各細胞群的標繪模式,可以預估是否存在形態異常及其趨勢。
圖2 散點圖顯示模式圖
三種類型的散點圖顯示
? 主散點圖:淋巴細胞/單核細胞+嗜堿性粒細胞/中性粒細胞+嗜酸性粒細胞分類用散點圖(Size-Complexity)
? NE-EO散點圖:中性粒細胞/嗜酸性粒細胞分類用散點圖(Size-Granularity)
? MO-BA散點圖:單核細胞/嗜堿性粒細胞分類用散點圖(Size-Granularity)
圖3 正常樣本的散點圖示例
在結合了細胞大小(FSS)與內部信息(FLS)的主散點圖中,通常大致顯示為2個分布集團(亞群),左側為LY+MO+BA區域(○),右側為NE+EO區域(○)。
前者中包含具有弱FLS強度(低復雜性)的淋巴細胞(LY)和單核細胞(MO),后者中包含具有強FLS強度(高復雜性)的嗜中性粒細胞(NE)和嗜酸性粒細胞(EO)2個集團。嗜堿性粒細胞(BA)從單核細胞區域到具有稍高復雜性的區域作圖。通常BA為具有分葉核的粒細胞,但由于它具有高度水溶性的顆粒,因此FS強度會降低。
在結合了細胞大小(FSS)與顆粒信息(SDS)的NE-EO散點圖中,對于在主散點圖上分布重疊的中性粒細胞(NE)和嗜酸性粒細胞(EO)的亞群,可以通過兩者的形態特征的差異進行辨別。
? 主散點圖
? NE-EO散點圖
在結合了細胞大小(FSS)與顆粒信息(SDS)的MO-BA散點圖中,對于在主散點圖上分布重疊的單核細胞(MO)和嗜堿性粒細胞(BA)的亞群,可以通過兩者的形態特征的差異進行辨別。
? MO-BA散點圖
1.3 標志與符號標記
數值異常標志
在檢測結果中出現以下標志時,意味著相應的參數偏離了標志判斷標準值。請通過目視進行檢查。
為了進行高精度的篩查,Celltac系列的白細胞5分類模型中標有各種標志和符號標記。本節將對其消息一覽表與分別代表的含義進行說明。
※除紅細胞指數異常外,可以改變判斷標準值。有關設置方法,請參照使用說明書。
圖4? 標志出現區域
標志?? | 英文名稱 | 表示出的形態異常 |
原始細胞 | Blasts | 疑似出現原始細胞 |
幼稚粒細胞 | Immature Gr | 疑似出現幼稚粒細胞 |
向左移 | Left shift | 疑似中性粒細胞向左移 |
異型淋巴細胞 | Atypical Ly | 疑似出現異型淋巴細胞 |
淋巴細胞 - 單核細胞干擾 | Ly-Mo Interference | 在主散點圖上無法正常區分LY標繪點和MO標繪點時 |
中性粒細胞 - 嗜酸性粒細胞干擾 | Ne-Eo Interference | 在NE-EO散點圖上無法正常區分NE標繪點和EO標繪點時 |
形態異常標志
如果在散點圖中觀察到分布異常,設備會顯示相應的標志。各標志出現的區域如圖4所示。
其他的異常信息
以下信息表示散點圖或直方圖的分布異常。
標志?? | 英文名稱 | 信息檢測標準 |
血小板聚集 | Plt Clumps | 疑似血小板聚集 |
小有核細胞 | Small Nucleated Cell | 在光學系統和電氣系統之間觀察到白細胞計數值有一定程度以上的偏差時 |
小有核細胞 | Poor hemolyzation | 在白細胞直方圖上識別出一定程度以上的紅細胞影時 |
血小板 - 紅細胞干擾 | PLT-RBC Interference | 當血小板和紅細胞的直方圖不能明確地分開時 |
符號標記
當數值數據旁邊顯示以下符號標記時,表明可能由于檢測值異常或機械誤差導致數據可靠性低。請考慮各方面因素后作出適當的應對。
數據標示? | 出現的主要原因 | 符號標記出現時的應對方法 |
* | 疑似出現干擾物質或異常細胞 | 請通過目視進行重新檢查 |
C | 疑似血小板聚集 | 請通過目視進行重新檢查 |
! | 疑似溶血不良或紅細胞指數異常 | 請通過目視進行重新檢查 |
? | 檢測出溫度異常或測量部位污跡 | 檢查稀釋液的溫度并進行洗滌操作 |
H | 超過異常判斷限值的上限 | 檢查稀釋液的溫度并進行洗滌操作 |
L | 低于異常判斷限值的下限 | 請根據檢查室規程進行確認 |
[ 注意 ]
- 上述標志或符號標記的功能都是表示存在異常細胞或異常檢測值,并不能用于識別異常細胞或確定疾病名稱。
- 如果檢測到某個標志,且數值旁邊出現“*”,說明數據可能不可靠。臨床上不要使用從儀器獲得的數據,請通過目視進行重新檢查。
散點圖和血細胞形態
2.
2.1 正常樣本的測量示例與布局范例
Celltac數據
數值結果? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?散點圖? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?直方圖
出現標志
散點圖/直方圖的說明
在此處進行散點圖和直方圖的說明。
涂片類型(染色方法)
涂片的照片
倍率
病例說明
在此處進行病例說明。
目視數據
原始細胞
早幼粒細胞
中幼粒細胞
晚幼粒細胞
條帶
Seg
淋巴細胞
異型淋巴細胞
單核細胞
嗜酸性粒細胞
嗜堿性粒細胞
其他
合計
NRBC/100WBC
紅細胞/其他觀察結果
2.2 造血干細胞的分化和成熟
從造血干細胞到每個血細胞的分化如下所示。同時,一并記載在造血干細胞成熟過程的某個階段中,通過腫瘤性增殖而發病的白血病及其病例記載頁面。
※ 這只是白血病發展階段的一個示例,實際中并不一定如所描述的一樣發展。
白細胞增多
2.
3.1 中性粒細胞增多
Celltac數據
數值結果? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?散點圖? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?直方圖
出現標志
散點圖/直方圖的說明
在NE-EO散點圖的中性粒細胞區域(○)中出現了許多標繪點,表明存在中性粒細胞增多。同時,還出現了表明“中性粒細胞增多”的標志。
目視數據
原始細胞
早幼粒細胞
中幼粒細胞
晚幼粒細胞
條帶? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? 8.0%
Seg? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?80.0%
淋巴細胞? ? ? ? ? ? ? ? ?1.0%
異型淋巴細胞
單核細胞? ? ? ? ? ? ? ?11.0%
嗜酸性粒細胞
嗜堿性粒細胞
其他
合計
NRBC/100WBC
紅細胞/其他觀察結果
外周血圖像
(May-Giemsa染色)
x400
病例說明
觀察到分葉核嗜中性粒細胞增加。沒有異常發現,特別是發育異常。
3.2 淋巴細胞增多
Celltac數據
數值結果? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?散點圖? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?直方圖
出現標志
散點圖/直方圖的說明
在主散點圖的淋巴細胞區域(○)中出現了許多標繪點,表明存在淋巴細胞增多。同時,還出現了表明“淋巴細胞增多”的標志。
目視數據
原始細胞
早幼粒細胞
中幼粒細胞
晚幼粒細胞
條帶? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?3.0%
Seg? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? 17.0%
淋巴細胞? ? ? ? ? ? ? ? 78.0%
異型淋巴細胞
單核細胞? ? ? ? ? ? ? ? ? 2.0%
嗜酸性粒細胞
嗜堿性粒細胞
其他
合計
NRBC/100WBC
紅細胞/其他觀察結果
外周血圖像
(May-Giemsa染色)
x400
病例說明
細胞大小為12~15μm,N/C為60~80%,細胞質顯示出淺藍色的成熟淋巴細胞增多。